Plasmide Double Nickase (h) HoxA2: sc-403732-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxA2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxA2 Double Nickase (h) et le plasmide HoxA2 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXA2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxA2 | sc-403732-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxA2 | sc-403732-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA2 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxA2, un régulateur se liant à l’ADN de manière spécifique à certaines séquences, qui contribue à établir la régionalisation antéro-postérieure et l’identité segmentaire au cours de l’embryogenèse, en particulier lors du développement des rhombomères du rhombencéphale et des dérivés du deuxième arc pharyngé. HoxA2 intègre des signaux développementaux aux programmes de chromatine et de transcription afin de contrôler la spécification des lignages, la différenciation neuronale et les processus morphogénétiques. Une expression dérégulée de HOXA2 a été rapportée dans plusieurs contextes de cancer et de différenciation, où des réseaux d’homéoboîtes altérés peuvent perturber la prolifération, l’invasion et la stabilité de l’identité cellulaire. En tant que régulateur du développement, HOXA2 est fréquemment étudié pour cartographier la logique enhancer–promoteur, la hiérarchie transcriptionnelle et les états épigénétiques qui maintiennent une expression génique spécifique des tissus.
HoxA2 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXA2 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXA2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXA2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXA2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.