Plasmide Double Nickase (h) HoxA11: sc-405264-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HoxA11 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HoxA11 Double Nickase (h) et le plasmide HoxA11 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HOXA11. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HoxA11 Antibody (B-11): sc-393440
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HoxA11 | sc-405264-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HoxA11 | sc-405264-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXA11 code le facteur de transcription à homéoboîte HoxA11, un régulateur se liant à l’ADN qui contribue à la mise en place de l’axe antéro-postérieur et à des programmes de différenciation spécifiques des tissus au cours du développement. Chez l’adulte, HOXA11 influence des réseaux transcriptionnels qui coordonnent les décisions de destinée cellulaire, le remodelage de la matrice extracellulaire et l’expression de gènes répondant aux hormones, en particulier dans les tissus mésenchymateux et reproducteurs. Une expression dérégulée de HOXA11 ou une altération de son contrôle régulateur a été associée à des anomalies du développement et a été étudiée dans des cancers et des troubles de la reproduction, où des programmes transcriptionnels aberrants et l’identité de lignée sont en cause. En tant que régulateur transcriptionnel spécifique de séquence, HoxA11 est couramment étudié pour cartographier les interactions enhancer–promoteur et définir les réseaux de gènes en aval qui façonnent l’architecture et la fonction des tissus.
HoxA11 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HOXA11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HOXA11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HOXA11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HOXA11.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.