Plasmide Double Nickase (h) hnRNP H3: sc-404805-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) hnRNP H3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide hnRNP H3 Double Nickase (h) et le plasmide hnRNP H3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HNRNPH3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: hnRNP H3 Antibody (D-4): sc-376416
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) hnRNP H3 | sc-404805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) hnRNP H3 | sc-404805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPH3 code pour la ribonucléoprotéine nucléaire hétérogène humaine hnRNP H3, une protéine liant l’ARN qui reconnaît des motifs riches en guanines (G) et aide à coordonner les choix d’épissage du pré‑ARNm. hnRNP H3 participe à la régulation de l’utilisation alternative des exons associée au spliceosome, en couplant le traitement de l’ARN à la transcription et à la maturation de l’ARNm. Par ces fonctions, elle contribue au contrôle de l’équilibre des isoformes de transcrits, qui façonne des voies telles que la régulation du cycle cellulaire, les réponses au stress et le métabolisme de l’ARN. La dérégulation de l’activité de la famille hnRNP et les perturbations des réseaux d’épissage sont fréquemment étudiées dans le contexte de la transformation oncogénique et des mécanismes des maladies neurodégénératives, ce qui fait de HNRNPH3 une cible utile pour explorer des phénotypes dépendants de l’épissage.
hnRNP H3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HNRNPH3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HNRNPH3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HNRNPH3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HNRNPH3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.