Plasmide Double Nickase (h) hnRNP A/B: sc-403454-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) hnRNP A/B correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide hnRNP A/B Double Nickase (h) et le plasmide hnRNP A/B Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HNRNPAB. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: hnRNP A/B Antibody (G-10): sc-376411
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) hnRNP A/B | sc-403454-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) hnRNP A/B | sc-403454-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPAB code la ribonucléoprotéine nucléaire hétérogène A/B (hnRNP A/B), une protéine de liaison à l’ARN qui s’associe aux transcrits naissants afin de coordonner l’épissage du pré‑ARNm, la stabilité de l’ARNm et le transport nucléocytoplasmique. En interagissant avec les complexes du spliceosome et, plus largement, avec des assemblages ribonucléoprotéiques, hnRNP A/B contribue à façonner la production d’isoformes de transcrits et des programmes de régulation génique post‑transcriptionnelle liés au contrôle du cycle cellulaire et aux réponses au stress. Des altérations de l’activité de la famille hnRNP et des défauts de traitement de l’ARN sont fréquemment impliqués dans des réseaux d’expression génique dérégulés observés dans des contextes de cancer et de maladies neurodégénératives, ce qui fait de HNRNPAB un point d’entrée pertinent pour des études mécanistiques du métabolisme de l’ARN. La perturbation fonctionnelle de HNRNPAB peut être exploitée pour analyser, au niveau des voies, les conséquences de changements d’épissage et des décisions affectant le devenir des ARN dans les cellules humaines.
hnRNP A/B Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HNRNPAB dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HNRNPAB. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HNRNPAB. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HNRNPAB.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.