HNF-6 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-420893

개요

Onecut1은 홈박스 전사인자 HNF-6를 암호화하며, 췌장·간·담도 계통을 포함한 마우스의 내배엽 유래 조직 분화에서 핵심 조절자로 작용한다. HNF-6는 시스 조절 요소에 결합해 상피 형태형성, 관(duct) 발달, 세포 운명 결정 등을 제어하는 전사 프로그램을 조율하며, 기관발생과 조직 항상성 과정에서 Notch, Wnt/β-카테닌, TGF-β 신호전달과 기능적으로 교차한다. Onecut1 활성이 변하면 췌장 내분비 발달과 관 구조 패터닝 결함과 연관되는 것으로 보고되어, 대사 기능 이상 및 발달 표현형 연구에서 중요한 표적이다. 실험계에서는 Onecut1/HNF-6 교란을 통해 염색질 상태를 계통(specification) 지정 및 기관 성숙과 연결하는 전사 네트워크를 규명하는 데 활용한다.

HNF-6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Onecut1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Onecut1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Onecut1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 HNF-6 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 HNF-6 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Onecut1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• HNF-6 기능에 중요한 Onecut1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Onecut1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• HNF-6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 HNF-6 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Onecut1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  HNF-6 HDR 플라스미드 (m) 및 HNF-6 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Onecut1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Onecut1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.