
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HNF-1β双切口酶质粒(h) | sc-400537-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HNF-1β双切口酶质粒(h2) | sc-400537-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNF1B 编码肝细胞核因子 1β(HNF‑1β),这是一种含同源结构域的转录因子,调控肾脏、胰腺、肝脏以及泌尿生殖道的上皮分化与器官发生。HNF‑1β 可结合启动子和增强子元件,协调参与小管转运、细胞极性与代谢稳态的基因网络,并整合塑造上皮细胞身份与形态发生的信号输入。HNF1B 依赖的转录程序受损与肾脏和尿路先天异常、肾囊性表型以及单基因糖尿病综合征相关,因此它是研究发育过程中转录调控的重要关键节点。在人源模型系统中,HNF‑1β 的功能通常通过谱系分化改变、上皮屏障特性以及下游靶基因表达的变化来评估。
HNF-1β 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 HNF1B 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HNF1B内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏HNF1B的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了HNF1B基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。