Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HNF-1α (F-7): sc-393925. Western blot analysis of HNF-1α expression in Hep G2 whole cell lysate (A) and human liver (B) and rat liver (C) tissue extracts.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
HNF-1α双切口酶质粒(h): sc-400594-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- HNF-1α 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- HNF-1α双切酶质粒（h）和HNF-1α双切酶质粒（h2）编码针对HNF1A的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：HNF-1α: sc-393925，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
HNF-1α双切口酶质粒(h) | sc-400594-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HNF-1α双切口酶质粒(h2) | sc-400594-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNF1A 编码肝细胞核因子 1-α（HNF-1α），这是一种含同源结构域的转录因子，可结合启动子和增强子元件，在肝细胞、胰岛 β 细胞、肾上皮以及肠道组织中调控基因表达程序。它协调参与葡萄糖感知与胰岛素分泌、脂质与胆汁酸代谢以及上皮分化等通路，部分通过与 HNF4A 及其他肝脏富集因子构成的转录网络实现。HNF-1α 活性的扰动会改变转运蛋白和代谢酶的表达，进而影响细胞稳态与谱系特异性基因表达。HNF1A 的遗传与功能变异与单基因及复杂代谢表型相关，因此常被用作解析代谢转录调控的关键节点。
HNF-1α 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 HNF1A 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对HNF1A内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏HNF1A的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了HNF1A基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。