Plasmide Double Nickase (h) HN1: sc-412133-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HN1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HN1 Double Nickase (h) et le plasmide HN1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HN1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HN1 Antibody (3G6): sc-517032
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HN1 | sc-412133-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HN1 | sc-412133-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HN1 (hematological and neurological expressed 1) code une petite protéine conservée impliquée dans la régulation de la prolifération cellulaire et des programmes de différenciation, avec une expression dynamique au cours du développement et dans les tissus en régénération. Dans les cellules humaines, l’abondance de HN1 a été associée au contrôle du cycle cellulaire et à des états transcriptionnels d’adaptation au stress, et elle est fréquemment étudiée dans le contexte de réseaux de signalisation qui influencent la croissance et la plasticité des lignages. Une expression altérée de HN1 a été rapportée dans de nombreux types de tumeurs, où elle est utilisée comme corrélat moléculaire de phénotypes agressifs et du remodelage des voies prolifératives. Ces caractéristiques font de HN1 une cible utile pour des études mécanistiques du contrôle de la croissance, du changement phénotypique et de la régulation génique dépendante du contexte.
HN1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HN1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HN1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HN1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HN1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.