Particules Lentivirales d'Activation (m) HMGI-C: sc-420880-LAC

Le gène murin **Hmga2** code la protéine architecturale de la chromatine **HMGI‑C**, un facteur non histonique qui se lie à l’ADN riche en AT et module l’assemblage de l’enhanceosome afin d’influencer des programmes transcriptionnels contrôlant la prolifération, l’engagement de lignée et le calendrier du développement. HMGI‑C s’intègre aux réseaux de remodelage de la chromatine et de facteurs de transcription pour ajuster la progression du cycle cellulaire, la plasticité épithélio‑mésenchymateuse et l’auto‑renouvellement des cellules souches/progénitrices. Une expression dérégulée de **Hmga2** est associée à des altérations du contrôle de la croissance et des états de différenciation, ce qui en fait un nœud moléculaire largement utilisé pour étudier la régulation génique du développement et les circuits transcriptionnels oncogéniques. Dans des modèles murins, **Hmga2** constitue un régulateur aisément manipulable des changements d’architecture du génome qui accompagnent la transformation, la régénération tissulaire et la reprogrammation cellulaire.

Les particules d'activation lentivirales HMGI-C (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Hmga2 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales HMGI-C (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Hmga2, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de HMGI-C. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Hmga2 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.