Plasmide Double Nickase (h) HLX1: sc-403700-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HLX1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HLX1 Double Nickase (h) et le plasmide HLX1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HLX. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HLX1 Antibody (1B9): sc-293328
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HLX1 | sc-403700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HLX1 | sc-403700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLX (HLX1) code un facteur de transcription homeobox qui régule les décisions de destinée cellulaire et les programmes de différenciation au cours du développement, avec des rôles majeurs dans les lignées hématopoïétiques et immunitaires. En se liant à des motifs d’ADN spécifiques de séquence, HLX1 module des réseaux transcriptionnels contrôlant la prolifération, la survie et l’engagement de lignée, en s’intégrant à des voies qui façonnent les réponses aux cytokines et la mise en place des patrons développementaux. Une expression dérégulée de HLX a été rapportée dans plusieurs contextes de cancer, en particulier dans les hémopathies malignes, où une altération du contrôle transcriptionnel peut contribuer à une croissance aberrante et à un blocage de la différenciation. En recherche fondamentale, HLX1 constitue un nœud d’étude de la régulation génique dépendante des homeobox et des circuits transcriptionnels dans des cellules humaines normales et transformées.
HLX1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HLX dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HLX. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HLX. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HLX.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.