Plasmide CRISPR/Cas9 KO HLX1 (m): sc-420868
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HLX1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HLX1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HLX1 Antibody (1B9): sc-293328
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HLX1 (m) | sc-420868 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
Hlx code HLX1, un facteur de transcription à homéoboîte qui régule des programmes d’expression génique contrôlant la mise en place des patrons embryonnaires et la spécification des lignages. Dans les systèmes murins, HLX1 est impliqué dans la différenciation hématopoïétique et le développement des cellules immunitaires, ce qui le relie à des réseaux transcriptionnels coordonnant la prolifération, la migration et la maturation. Grâce à son homéodomaine de liaison à l’ADN, HLX1 influence des voies de régulation développementales et immunitaires en aval, contribuant à définir les décisions de destin cellulaire dans de multiples tissus. Une activité dérégulée de Hlx a été associée à des états de différenciation altérés et à des phénotypes pertinents pour des défauts du développement et des modèles de maladies liées à l’immunité.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HLX1 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Hlx dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Hlx, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Hlx à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HLX1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Hlx pour l'étude de la signalisation de HLX1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de Hlx essentiels à la fonction de HLX1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Hlx pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HLX1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le HLX1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Hlx. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HLX1 plasmide HDR (m) et le HLX1 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Hlx pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Hlx définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.