Plasmide Double Nickase (h) HLA-F: sc-410821-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HLA-F correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HLA-F Double Nickase (h) et le plasmide HLA-F Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HLA-F. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HLA-F Antibody (201A2H): sc-517640
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HLA-F | sc-410821-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HLA-F | sc-410821-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLA-F code une molécule non classique du CMH de classe I qui participe à la surveillance immunitaire en modulant les interactions entre les cellules présentatrices d’antigènes et les récepteurs des lymphocytes, y compris les récepteurs inhibiteurs et activateurs des cellules NK. Contrairement aux protéines HLA de classe I classiques, hautement polymorphes, HLA-F présente un polymorphisme limité et est impliquée dans la régulation de la tolérance immunitaire, de la signalisation inflammatoire et des réponses au stress cellulaire. L’expression de HLA-F est dynamique dans les cellules immunitaires activées et peut influencer le contexte de présentation antigénique, les seuils d’activation de l’immunité innée et les voies dépendantes des cytokines dans le microenvironnement. Une dérégulation de HLA-F a été associée à des phénotypes modifiés d’échappement immunitaire et à des profils d’infiltration immunitaire rapportés dans des affections inflammatoires et de nombreux cancers, ce qui soutient son utilisation dans des études mécanistiques en immunologie.
HLA-F Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HLA-F dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HLA-F. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HLA-F. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HLA-F.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.