Plasmide Double Nickase (m) Histone Deacetylase 5 (HDAC5): sc-420819-NIC

Hdac5 code l’histone désacétylase 5 (HDAC5), une HDAC de classe IIa qui agit comme un régulateur de la chromatine sensible aux signaux, coordonnant des programmes transcriptionnels qui gouvernent la différenciation, le métabolisme et l’adaptation au stress. HDAC5 navette entre le noyau et le cytoplasme en réponse à sa phosphorylation par des kinases telles que CaMK et AMPK, reliant les signaux calciques et énergétiques au contrôle épigénétique de l’expression génique. Par ses interactions avec des facteurs de transcription, notamment MEF2, elle module des réseaux géniques neuronaux et musculaires et contribue au remodelage transcriptionnel dépendant de l’activité. Une activité d’HDAC5 dérégulée a été associée à des altérations de la signalisation inflammatoire, au remodelage cardiaque et du muscle squelettique, ainsi qu’à des phénotypes neurocomportementaux, ce qui étaye sa pertinence dans des modèles de maladies cardiométaboliques et neurodéveloppementales.

Histone Deacetylase 5 (HDAC5) Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Hdac5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Hdac5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Hdac5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Hdac5.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.