Particules Lentivirales d'Activation (h) Histone Deacetylase 11 (HDAC11): sc-402103-LAC

HDAC11 code l’histone désacétylase 11, la seule désacétylase d’histones de classe IV, qui régule l’accessibilité de la chromatine et les programmes transcriptionnels via la désacylation des lysines, notamment des activités de désacétylation et de retrait de chaînes acyles grasses. En façonnant les états épigénétiques, HDAC11 influence la différenciation des cellules immunitaires et la signalisation inflammatoire, en modulant des voies qui contrôlent l’expression des cytokines, la présentation d’antigènes et l’adaptation métabolique. Des altérations de l’expression ou de l’activité de HDAC11 ont été associées à des réponses immunitaires dérégulées et à des états transcriptionnels oncogéniques, ce qui justifie son étude en immunologie, en biologie hématologique et en épigénétique tumorale. Ces fonctions font de HDAC11 un point d’entrée utile pour explorer comment les enzymes épigénétiques coordonnent des réseaux d’expression génique qui gouvernent la prolifération, la différenciation et les réponses au stress.

Les particules d'activation lentivirales Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de HDAC11 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Histone Deacetylase 11 (HDAC11) (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription HDAC11, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Histone Deacetylase 11 (HDAC11). L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif HDAC11 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.