Particules Lentivirales d'Activation (m) Histone Deacetylase 1 (HDAC1): sc-436647-LAC

Le gène murin *Hdac1* code l’histone désacétylase 1 (HDAC1), une HDAC de classe I qui retire des groupements acétyle des résidus lysine des histones et d’autres substrats nucléaires afin de réguler l’accessibilité de la chromatine et les programmes transcriptionnels. HDAC1 agit au sein d’assemblages corépresseurs multiprotéiques, notamment SIN3, NuRD et CoREST, ce qui l’associe au contrôle du cycle cellulaire, aux réponses aux dommages de l’ADN et à la différenciation spécifique de lignée. En se couplant à des facteurs de transcription et à des remodeleurs de la chromatine, HDAC1 façonne des états épigénétiques qui influencent la prolifération, l’apoptose et l’expression des gènes du développement. Une activité d’HDAC1 dérégulée est fréquemment étudiée dans des contextes de répression transcriptionnelle oncogénique, de phénotypes neurodéveloppementaux et d’états d’activation des cellules immunitaires, ce qui en fait un nœud central des mécanismes pathologiques pilotés par l’épigénétique dans les modèles murins.

Les particules d'activation lentivirales Histone Deacetylase 1 (HDAC1) (m) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de Hdac1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Histone Deacetylase 1 (HDAC1) (m) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription Hdac1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Histone Deacetylase 1 (HDAC1). L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif Hdac1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.