Histone cluster 1 H2BK Plasmide Double Nickase (h): sc-417678-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- Histone cluster 1 H2BK Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il Histone cluster 1 H2BK Double Nickase Plasmid (h) e il Histone cluster 1 H2BK Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HIST1H2BK. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
Histone cluster 1 H2BK Plasmide Double Nickase (h) | sc-417678-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Histone cluster 1 H2BK Plasmide Double Nickase (h2) | sc-417678-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIST1H2BK codifica un’istone della famiglia H2B dipendente dalla replicazione, che si incorpora nei nucleosomi per compattare il DNA genomico e regolare l’accessibilità della cromatina. Attraverso il suo ruolo nell’assemblaggio dei nucleosomi, nello scambio di istoni e nell’organizzazione della cromatina di ordine superiore, Histone cluster 1 H2BK influenza il controllo della trascrizione, la tempistica della replicazione del DNA e la segnalazione e riparazione dei danni al DNA. Le modificazioni post-traduzionali di H2B, inclusi ubiquitinazione e fosforilazione, partecipano a un “crosstalk” con altri marcatori istonici che coordinano la progressione del ciclo cellulare e la stabilità del genoma. Un dosaggio deregolato dei geni istonici o stati della cromatina alterati sono ampiamente associati a programmi trascrizionali oncogenici e a una riparazione del DNA aberrante, rendendo HIST1H2BK un locus utile per studiare meccanismi epigenetici rilevanti per il rimodellamento della cromatina associato alle malattie.
Histone cluster 1 H2BK Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HIST1H2BK nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HIST1H2BK. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HIST1H2BK. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HIST1H2BK interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.