Plasmide Double Nickase (h) Histamine H4 Receptor: sc-402430-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Histamine H4 Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Histamine H4 Receptor Double Nickase (h) et le plasmide Histamine H4 Receptor Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HRH4. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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Plasmide Double Nickase (h) Histamine H4 Receptor | sc-402430-NIC | 20 µg | $410.00 |
HRH4 code le récepteur H4 de l’histamine (H4R), un récepteur couplé aux protéines G de classe A, principalement associé à Gi/o, qui module la chimiotaxie des cellules immunitaires, la libération de cytokines et le tonus inflammatoire en réponse à l’histamine. L’engagement du récepteur influence des voies de signalisation de seconds messagers, notamment une diminution de l’AMPc, la mobilisation du calcium et l’activité en aval de la voie MAPK/ERK, façonnant ainsi les programmes de trafic et d’activation des leucocytes. L’expression de HRH4 dans les lignées hématopoïétiques relie ce récepteur à la régulation de l’inflammation allergique et, plus largement, à des processus immuno‑médiés, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques des réseaux de signalisation inflammatoire. Une signalisation histamine–H4R dysrégulée a été associée à des phénotypes inflammatoires et prurigineux dans des contextes de recherche préclinique et translationnelle, ce qui étaye son utilisation comme nœud fonctionnel pour l’exploration des voies en immunologie.
Histamine H4 Receptor Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HRH4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HRH4. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HRH4. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HRH4.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.