Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) HIP1: sc-402515-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HIP1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HIP1 Double Nickase (h) et le plasmide HIP1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HIP1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HIP1 Antibody (4B10): sc-47754
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HIP1 | sc-402515-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HIP1 | sc-402515-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HIP1 humain (huntingtin interacting protein 1) code une protéine adaptatrice de l’endocytose qui relie les puits recouverts de clathrine au cytosquelette d’actine et coordonne le trafic des récepteurs tyrosine kinases et d’autres protéines membranaires. Via son domaine ANTH et ses interactions avec la clathrine et AP-2, HIP1 contribue à réguler l’internalisation, le recyclage et la signalisation issue des récepteurs aux facteurs de croissance, influençant des voies qui contrôlent la prolifération, la survie et la dynamique du cytosquelette. Une expression altérée de HIP1 ou des réarrangements ont été rapportés dans plusieurs cancers et sont étudiés pour leur impact sur le renouvellement des récepteurs et la signalisation oncogénique. HIP1 est également étudiée dans le contexte de la protéostasie et des neurosciences en raison de son lien fonctionnel avec des processus associés à la huntingtine.
HIP1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HIP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HIP1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HIP1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HIP1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.