Plasmide Double Nickase (h) Herc5: sc-404993-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Herc5 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Herc5 Double Nickase (h) et le plasmide Herc5 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HERC5. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Herc5 | sc-404993-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Herc5 | sc-404993-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HERC5 code une ligase E3 inductible par l’interféron, qui constitue l’enzyme E3 principale de la conjugaison d’ISG15 (ISGylation), en modifiant les protéines nouvellement synthétisées et en façonnant les défenses antivirales de l’immunité innée. Herc5 se localise aux ribosomes et coordonne son action avec les enzymes E1 (UBE1L) et E2 (UBE2L6) afin de réguler la stabilité et le trafic des protéines, ainsi que les signaux immunitaires en réponse à l’interféron de type I. En contrôlant la dynamique de l’ISGylation, HERC5 influence des voies liées à la restriction des agents pathogènes, aux réponses au stress et à la protéostasie, et sa dérégulation est étudiée dans des contextes de perturbation de la signalisation de l’interféron et d’états inflammatoires. Ce gène est fréquemment examiné comme un nœud reliant les modifications de type ubiquitine aux interactions hôte–virus et aux phénotypes cellulaires médiés par l’immunité.
Herc5 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HERC5 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HERC5. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HERC5. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HERC5.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.