Plasmide Double Nickase (h) Hepatic Lipase: sc-403928-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Hepatic Lipase correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Hepatic Lipase Double Nickase (h) et le plasmide Hepatic Lipase Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant LIPC. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Hepatic Lipase Antibody (XHL3-6): sc-21740
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Hepatic Lipase | sc-403928-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Hepatic Lipase | sc-403928-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène humain **LIPC** code la lipase hépatique, une lipase des triglycérides liée à l’endothélium qui hydrolyse les triglycérides et les phospholipides des lipoprotéines circulantes, influençant le remodelage des HDL et la conversion des IDL en LDL. En régulant la composition et la clairance des lipoprotéines, la lipase hépatique fait le lien entre le transport lipidique et les voies de captation hépatique, et contribue à l’homéostasie énergétique systémique. Des altérations de l’activité ou de l’expression de **LIPC** ont été associées à des phénotypes de dyslipidémie, notamment des variations du cholestérol HDL et de la distribution des particules lipidiques, ce qui en fait une cible utile pour des études mécanistiques du métabolisme lipidique. **LIPC** est également étudié dans le cadre des voies de risque cardiométabolique et des effets gène‑environnement sur les profils lipidiques plasmatiques.
Hepatic Lipase Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus LIPC dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de LIPC. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de LIPC. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de LIPC.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.