Particules Lentivirales d'Activation (h) Heme Oxygenase 1/HMOX1: sc-400157-LAC

HMOX1 code l’hème oxygénase 1 (HO-1), une enzyme inductible et sensible au stress qui catalyse la dégradation de l’hème en biliverdine (ensuite convertie en bilirubine), fer ferreux et monoxyde de carbone. En régulant l’hème intracellulaire et l’équilibre rédox, HO-1 influence les réponses au stress oxydatif, l’homéostasie mitochondriale, la gestion du fer et la signalisation inflammatoire, et est fréquemment induite en aval de NRF2/KEAP1 et d’autres voies activées par le stress. Une expression altérée de HMOX1 est souvent étudiée dans des contextes de dysfonction vasculaire, de neuroinflammation, de stress métabolique et de remodelage du microenvironnement tumoral, où ses produits enzymatiques peuvent moduler la signalisation des cytokines, l’autophagie et les programmes de survie cellulaire. Ces caractéristiques font de HMOX1 un nœud central pour l’étude des réseaux transcriptionnels cytoprotecteurs et des mécanismes de lésions dépendants de l’hème/du fer dans des modèles cellulaires humains.

Les particules d'activation lentivirales Heme Oxygenase 1/HMOX1 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de HMOX1 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Heme Oxygenase 1/HMOX1 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription HMOX1, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Heme Oxygenase 1/HMOX1. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif HMOX1 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.