Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO Headpin (h): sc-409662
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Headpin Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique Headpin, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Headpin Antibody (E-1): sc-398857
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO Headpin (h) | sc-409662 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
SERPINB13 code l’inhibiteur humain de sérine protéase Headpin, une serpine de clade B (intracellulaire) fortement exprimée dans les épithéliums stratifiés. Headpin régule la protéolyse en inhibant certaines protéases de type trypsine, contribuant à maintenir l’intégrité de la barrière épithéliale ainsi que l’homéostasie protéase–antiprotéase au cours de la différenciation et du remodelage tissulaire. En limitant une activité protéasique aberrante, SERPINB13 peut influencer la signalisation inflammatoire, la survie cellulaire et les réponses au stress associées aux lésions épithéliales. Des modifications de l’expression de SERPINB13 ont été rapportées dans diverses pathologies épithéliales, ce qui en fait une cible utile pour étudier les mécanismes reliant le contrôle des protéases à la biologie des kératinocytes et à des phénotypes pertinents pour la maladie.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Headpin (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SERPINB13 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SERPINB13, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SERPINB13 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Headpin.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SERPINB13 pour l'étude de la signalisation de Headpin, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de SERPINB13 essentiels à la fonction de Headpin
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SERPINB13 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le Headpin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Headpin plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SERPINB13. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le Headpin plasmide HDR (h) et le Headpin (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SERPINB13 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SERPINB13 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.