Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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HDGF Plasmide Double Nickase (h): sc-402859-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- HDGF Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il HDGF Double Nickase Plasmid (h) e il HDGF Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira HDGF. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: HDGF Antibody (E-7): sc-271344
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
HDGF Plasmide Double Nickase (h) | sc-402859-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
HDGF Plasmide Double Nickase (h2) | sc-402859-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il fattore di crescita derivato dall’epatoma (HDGF) è una proteina nucleare legante l’eparina che funge da regolatore mitogeno e trascrizionale, collegando segnali extracellulari a programmi che controllano la progressione del ciclo cellulare, la sopravvivenza e la differenziazione. HDGF partecipa a processi associati alla cromatina ed è stato collegato a reti di segnalazione come MAPK/ERK e PI3K/AKT, che modellano la proliferazione e le risposte allo stress. Un’espressione deregolata di HDGF è stata riportata in molteplici contesti tumorali ed è frequentemente studiata in relazione all’invasione, all’espressione di geni associati all’angiogenesi e alla resistenza allo stress cellulare. Inoltre, HDGF svolge ruoli nello sviluppo e nel rimodellamento tissutale, rendendolo rilevante per l’indagine dei meccanismi di controllo della crescita in modelli cellulari umani.
HDGF Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus HDGF nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di HDGF. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di HDGF. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con HDGF interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.