Plasmide Double Nickase (h) HDGF: sc-402859-NIC

Le facteur de croissance dérivé de l’hépatome (HDGF) est une protéine nucléaire se liant à l’héparine, qui agit comme régulateur mitogène et transcriptionnel, reliant des signaux extracellulaires à des programmes contrôlant la progression du cycle cellulaire, la survie et la différenciation. HDGF participe à des processus associés à la chromatine et a été rattaché à des réseaux de signalisation tels que MAPK/ERK et PI3K/AKT, qui modulent la prolifération et les réponses au stress. Une expression dérégulée de HDGF est rapportée dans de nombreux contextes tumoraux et fait souvent l’objet d’études en lien avec l’invasion, l’expression de gènes associés à l’angiogenèse et la résistance au stress cellulaire. De plus, HDGF intervient dans le développement et le remodelage tissulaire, ce qui en fait une cible pertinente pour l’étude des mécanismes de contrôle de la croissance dans des modèles cellulaires humains.

HDGF Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HDGF dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HDGF. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HDGF. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HDGF.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.