Plasmide Double Nickase (h) HCF1: sc-403097-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) HCF1 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide HCF1 Double Nickase (h) et le plasmide HCF1 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant HCFC1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HCF1 Antibody (H-8): sc-390950
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) HCF1 | sc-403097-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) HCF1 | sc-403097-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HCFC1 code pour le facteur de cellule hôte 1 (HCF1), un corégulateur transcriptionnel associé à la chromatine qui coordonne la progression du cycle cellulaire et les programmes transcriptionnels en faisant le lien entre des facteurs de transcription spécifiques de séquence et des complexes épigénétiques et coactivateurs. HCF1 contribue à la régulation des gènes dépendants d’E2F, à la dynamique des modifications des histones et à la progression mitotique, soutenant le contrôle de la prolifération et l’homéostasie cellulaire. Par ces interactions, HCF1 influence des voies impliquées dans la réplication de l’ADN, les réponses au stress et l’expression génique spécifique de certaines lignées cellulaires. Des variants et la dérégulation de HCFC1 ont été associés à des phénotypes neurodéveloppementaux et à une altération du contrôle transcriptionnel, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques dans les cellules humaines.
HCF1 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HCFC1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HCFC1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HCFC1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HCFC1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.