HB-EGF Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400795-NIC

O gene humano **HBEGF** codifica o fator de crescimento semelhante ao EGF com afinidade por heparina (HB‑EGF), um ligante ancorado à membrana que pode ser clivado por proteólise, gerando um fator de crescimento solúvel. O HB‑EGF sinaliza principalmente por meio de receptores da família **EGFR/ERBB** para regular a atividade das vias **MAPK/ERK** e **PI3K–AKT**, influenciando a proliferação, a sobrevivência e a migração celulares, bem como a remodelação associada à cicatrização. Sua expressão e o shedding do ectodomínio estão estreitamente ligados à sinalização inflamatória e responsiva ao estresse e à atividade de proteases mediadas por **ADAM** na superfície celular. A desregulação da sinalização **HBEGF/EGFR** tem sido associada a respostas epiteliais e vasculares alteradas em contextos como fibrose, biologia do câncer e remodelamento cardiovascular, tornando-a relevante para estudos mecanísticos de programas conduzidos por fatores de crescimento.

HB-EGF O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus HBEGF em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de HBEGF. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função HBEGF. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com HBEGF interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.