Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO HAP1 (h): sc-405778
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- HAP1 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique HAP1, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: HAP1 Antibody (C-3): sc-166245
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO HAP1 (h) | sc-405778 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
HAP1 (huntingtin-associated protein 1) est une protéine d’échafaudage cytoplasmique, enrichie dans les neurones, qui se lie à la huntingtine et coordonne des complexes de trafic et de signalisation. Elle contribue au transport dépendant des microtubules, au tri endosomal et à la dynamique vésiculaire, influençant le recyclage des récepteurs et la croissance des neurites. HAP1 interagit également avec des régulateurs du cytosquelette et des protéines motrices afin de moduler la distribution intracellulaire des organites et des cargaisons. Les voies de transport et de protéostasie liées à HAP1, lorsqu’elles sont altérées, sont fréquemment étudiées dans le cadre de mécanismes neurodégénératifs, notamment les phénotypes de stress cellulaire associés à la maladie de Huntington.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO HAP1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène HAP1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du HAP1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert HAP1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine HAP1.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en HAP1 pour l'étude de la signalisation de HAP1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de HAP1 essentiels à la fonction de HAP1
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de HAP1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le HAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le HAP1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus HAP1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le HAP1 plasmide HDR (h) et le HAP1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie HAP1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles HAP1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.