H2BFWT CRISPR/Cas9 KO Plasmid (h): sc-407111

Übersicht

H2BFWT kodiert ein menschliches Mitglied der Histon-H2B-Familie, das an der Organisation von Nukleosomen und der höherstufigen Chromatinarchitektur beteiligt ist und dadurch die Zugänglichkeit des Genoms für Transkription, Replikation und DNA-Reparatur beeinflusst. Als zentraler Bestandteil des Chromatins trägt H2BFWT zur Koordination epigenetischer Regulation sowie chromatinabhängiger Prozesse wie Zellzyklusprogression und Aufrechterhaltung der genomischen Stabilität bei. Eine veränderte Histondosierung oder Chromatinzusammensetzung ist häufig mit fehlregulierten Genexpressionsprogrammen verknüpft und kann Signalwege modulieren, die an Onkogenese und Entwicklungsstörungen beteiligt sind. Daher ist H2BFWT relevant für Studien zu Chromatindynamik, Transkriptionskontrolle und DNA-Schadensantworten in menschlichen Zellen.

Das H2BFWT CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) ist ein Pool von Plasmiden, die für die gezielte Disruption des H2BFWT-Gens in human-Zelllinien entwickelt wurden. Jedes Plasmid koexprimiert eine einzigartige Single-Guide-RNA (sgRNA), die auf eine bestimmte Stelle innerhalb des H2BFWT-Gens abzielt, zusammen mit der Streptococcus pyogenes Cas9-Nuklease. Die Plasmide kodieren zudem für GFP, was die fluoreszente Identifizierung und Anreicherung erfolgreich transfizierter Zellen mittels Fluoreszenzmikroskopie oder Durchflusszytometrie ermöglicht.

Das Multi-Guide-Design erhöht die Wahrscheinlichkeit, dass Insertionen oder Deletionen (Indels) entstehen, die den offenen Leserahmen von H2BFWT nach der Cas9-vermittelten Bildung von Doppelstrangbrüchen unterbrechen. Durch das CRISPR/Cas9-System verursachte DNA-Brüche werden über endogene NHEJ-Wege (Non-Homologous End Joining) repariert, was häufig zu Frameshift-Mutationen führt, die die H2BFWT-Proteinexpression aufheben.

Dieses CRISPR-Knockout-System ermöglicht die effiziente Erzeugung von H2BFWT-defizienten Zellmodellen zur Untersuchung der H2BFWT-Signalübertragung, für funktionelle Genomstudien, in der Krebsbiologieforschung sowie zur Bewertung therapeutischer Reaktionen in menschlichen Zelllinien.

Hauptmerkmale

• sgRNAs, die auf H2BFWT-Exone abzielen, die für die H2BFWT-Funktion entscheidend sind
  Ko-Expression von SpCas9 und sgRNA aus einem einzigen Plasmid zur vereinfachten Verabreichung
  GFP-Reporter zur Identifizierung transfizierter Zellen
  Pool von Plasmiden, die auf mehrere H2BFWT-Genomstellen abzielen, um die Knockout-Effizienz zu verbessern
  Kompatibel mit der Verabreichung durch Transfektion

Designvarianten

CRISPRs +/- HDRs

• gRNAs, die vom H2BFWT CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h) und vom H2BFWT CRISPR/Cas9-KO-Plasmid (h2) kodiert werden, zielen auf unterschiedliche Stellen innerhalb des H2BFWT-Lokus ab. Es kann ein oder beide Targeting-Designs verfügbar sein. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.
  HDR-Donorkonstrukte, kodiert durch das H2BFWT HDR-Plasmid (h) und H2BFWT HDR-Plasmid (h2) kodiert, enthalten eine Puromycin-Resistenzkassette und einen RFP-Reporter, flankiert von H2BFWT-Homologiearmen, um die homologe Reparatur an definierten H2BFWT-Zielstellen entsprechend den CRISPR/Cas9-KO-Designs zu unterstützen. Die Verfügbarkeit von HDR-Donoren kann variieren. Siehe „Verwandte Produkte“ für Verfügbarkeit.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.