Gγ 5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-407524
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Gγ 5 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Gγ 5, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Gγ 5 Anticuerpo (3B8): sc-517161
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Gγ 5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-407524 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
GNG5 codifica la subunidad humana Gγ5, un componente central de las proteínas G heterotriméricas que acoplan los receptores acoplados a proteína G (GPCR) activados con la señalización aguas abajo. Al asociarse con subunidades Gβ, los dímeros Gβγ regulan enzimas efectoras y canales iónicos, modulando vías de segundos mensajeros como la adenilil ciclasa/AMPc, la fosfolipasa Cβ/IP3–DAG y la señalización PI3K–AKT. La señalización dependiente de Gγ5 influye en procesos como la migración celular, la excitabilidad de membrana y la remodelación del citoesqueleto, y la actividad alterada de las vías GPCR/proteína G se implica con frecuencia en la biología del cáncer, la inflamación y disfunciones cardiovasculares y neurológicas.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Gγ 5 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GNG5 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GNG5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GNG5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Gγ 5.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GNG5 para la investigación de la señalización de Gγ 5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de GNG5 críticos para la función de Gγ 5
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GNG5 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Gγ 5 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Gγ 5 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GNG5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Gγ 5 (h) y el plásmido HDR Gγ 5 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GNG5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GNG5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.