Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) Gα q: sc-400500-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) Gα q correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide Gα q Double Nickase (h) et le plasmide Gα q Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GNAQ. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: Gα q Antibody (10): sc-136181
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) Gα q | sc-400500-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) Gα q | sc-400500-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNAQ code la sous-unité alpha Gαq d'une protéine G hétérotrimérique, un transducteur central des signaux émis par les récepteurs couplés aux protéines G vers la phospholipase C-β. Lorsqu'elle est activée, Gαq favorise l'hydrolyse du PIP2 pour générer l'IP3 et le DAG, ce qui augmente le Ca2+ intracellulaire et active la PKC, influençant ainsi la signalisation MAPK, la dynamique du cytosquelette, la sécrétion et les programmes transcriptionnels. La signalisation dépendante de GNAQ façonne les décisions de destinée cellulaire dans de nombreux tissus et est fréquemment étudiée dans le contexte de voies de croissance et de survie aberrantes induites par les GPCR. Des altérations activatrices récurrentes de GNAQ sont associées à la biologie des néoplasies mélanocytaires et à d'autres troubles dans lesquels une dérégulation de l'axe calcium/PKC–MAPK contribue à des phénotypes pathogènes.
Gα q Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GNAQ dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GNAQ. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GNAQ. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GNAQ.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.