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Partículas Lentivirales de Activación (h) GSTO1 | sc-404107-LAC | 200 µl | $455.00 |
La glutatión S-transferasa omega 1 (GSTO1) es una tioltransferasa citosólica con actividades desglutatiónilasa y moduladora del estado redox que la distinguen de las enzimas GST canónicas. Al regular las reacciones de desintoxicación dependientes de glutatión y el estado de S-glutatiónilación de proteínas, GSTO1 influye en las defensas antioxidantes celulares, la señalización inflamatoria y la proteostasis bajo estrés oxidativo. Su actividad se ha vinculado con la modulación de vías relacionadas con el manejo de especies reactivas de oxígeno, el metabolismo de xenobióticos y programas transcripcionales sensibles al estado redox. La expresión o función alteradas de GSTO1 se estudian en el contexto de la neurodegeneración, las respuestas al estrés cardiometabólico y la adaptación redox asociada al cáncer, donde los cambios en la homeostasis redox pueden moldear fenotipos relevantes para la enfermedad.
Las partículas de activación lentiviral GSTO1 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de GSTO1 en una gama más amplia de tipos de células humanas.
Las partículas de activación lentiviral GSTO1 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción GSTO1, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de GSTO1. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo GSTO1 y la arquitectura reguladora.
El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.