Plasmide Double Nickase (h) GSTM3: sc-404418-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GSTM3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GSTM3 Double Nickase (h) et le plasmide GSTM3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GSTM3. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GSTM3 | sc-404418-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GSTM3 | sc-404418-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
La glutathion S-transférase mu 3 (GSTM3) est une enzyme cytosolique de détoxification de phase II qui catalyse la conjugaison du glutathion à des composés électrophiles, contribuant à la défense cellulaire contre le stress oxydatif et les agressions xénobiotiques. En modulant l’homéostasie rédox et le traitement des produits de peroxydation lipidique, GSTM3 influence des voies liées à la neutralisation des espèces réactives de l’oxygène, à la signalisation inflammatoire et à la protéostasie. Des variations de l’expression ou de l’activité de GSTM3 ont été associées à une susceptibilité modifiée aux dommages induits par des agents chimiques et à des différences interindividuelles de réponse aux médicaments et à l’environnement, ce qui en fait une cible pertinente pour les études de toxicologie et de biologie de l’adaptation au stress. En biologie du cancer et dans les contextes d’inflammation chronique, GSTM3 est fréquemment étudiée pour son impact sur la tolérance au stress des cellules tumorales et sur des phénotypes liés au métabolisme.
GSTM3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GSTM3 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GSTM3. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GSTM3. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GSTM3.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.