Plasmide Double Nickase (h) GSKIP: sc-412211-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GSKIP correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GSKIP Double Nickase (h) et le plasmide GSKIP Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GSKIP. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GSKIP | sc-412211-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GSKIP | sc-412211-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GSKIP (GSK3β interaction protein) code une petite protéine échafaudage qui se lie à la glycogène synthase kinase 3β et contribue à positionner cette kinase au sein d’assemblages multiprotéiques de signalisation. En modulant des événements de phosphorylation dépendants de GSK3, GSKIP peut influencer des voies associées à la signalisation Wnt/β-caténine, à la dynamique de signalisation AMPc/PKA, ainsi qu’au contrôle plus large des décisions de destinée cellulaire, de la prolifération et des programmes de différenciation. Une régulation altérée des réseaux centrés sur GSK3 est fréquemment liée à une croissance dérégulée et à des phénotypes du développement, ce qui fait de GSKIP un nœud utile pour étudier les interactions et le « cross-talk » entre voies. En tant que protéine humaine impliquée dans l’échafaudage de kinases, GSKIP soutient des études mécanistiques de la spécificité et de la compartimentalisation de la signalisation dans des contextes cellulaires pertinents pour les maladies.
GSKIP Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GSKIP dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GSKIP. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GSKIP. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GSKIP.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.