GRHL3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404946

Descripción general

GRHL3 (factor de transcripción tipo grainyhead 3) es un regulador transcripcional específico de secuencia que coordina la diferenciación epitelial, la formación de barrera y los programas génicos inducidos por la respuesta a heridas. Ayuda a mantener la homeostasis epidérmica al modular la proliferación de los queratinocitos y las redes de diferenciación terminal, y se integra con vías que controlan la polaridad celular, la adhesión y el control transcripcional de genes estructurales y de unión intercelular. La actividad desregulada de GRHL3 se ha asociado con defectos del desarrollo y patologías epiteliales, y se han descrito patrones de expresión alterados en estudios de epitelios escamosos y estados transcripcionales asociados a carcinomas. Como factor nuclear que modela la expresión génica epitelial, GRHL3 se investiga con frecuencia en modelos de morfogénesis tisular, respuestas al estrés y compromiso de linaje.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GRHL3 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GRHL3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GRHL3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GRHL3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GRHL3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GRHL3 para la investigación de la señalización de GRHL3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GRHL3 críticos para la función de GRHL3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GRHL3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GRHL3 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido GRHL3 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GRHL3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GRHL3 (h) y el plásmido HDR GRHL3 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GRHL3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GRHL3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.