Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide Double Nickase (m) GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor: sc-420693-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor Double Nickase (m) et le plasmide GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Nr3c1. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor Antibody (G-5): sc-393232
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor | sc-420693-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor | sc-420693-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin Nr3c1 code le récepteur des glucocorticoïdes (GR/NR3C1), un récepteur nucléaire activé par un ligand, qui convertit les signaux glucocorticoïdes en programmes transcriptionnels dépendants du contexte. Après liaison de l’hormone, le GR régule l’accessibilité de la chromatine et l’expression génique via une fixation directe sur des éléments de réponse aux glucocorticoïdes et par « tethering » (interaction) avec d’autres facteurs de transcription, en s’intégrant aux voies NF-κB et AP-1 pour façonner les réponses inflammatoires et au stress. L’activité de NR3C1 influence le métabolisme, la biologie circadienne, l’apoptose et la différenciation des cellules immunitaires ; sa dysrégulation est impliquée dans une sensibilité aux glucocorticoïdes altérée, des phénotypes de stress neuroendocrinien et des modèles de maladies inflammatoires. En recherche sur le cancer et le métabolisme, la signalisation du GR est étudiée pour ses rôles dans l’adaptation cellulaire au stress, les voies de réponse aux traitements et la régulation transcriptionnelle spécifique des tissus.
GR/NR3C1/Glucocorticoid Receptor Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Nr3c1 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Nr3c1. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Nr3c1. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Nr3c1.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.