Plásmido Doble Nickase (m) GPRC5B: sc-425694-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)GPRC5B consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GPRC5B (m) y el plásmido de doble nickasa GPRC5B (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Gprc5b. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) GPRC5B | sc-425694-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) GPRC5B | sc-425694-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
El gen murino **Gprc5b** codifica **GPRC5B**, una proteína de membrana tipo receptor acoplado a proteína G huérfano, implicada en la modulación de cascadas de señalización intracelular aguas abajo de señales de factores de crecimiento y citocinas. GPRC5B se ha relacionado con la regulación de la actividad de las vías **MAPK/ERK** y **PI3K–AKT**, influyendo en la proliferación celular, la diferenciación y la homeostasis metabólica de manera dependiente del tejido. En el sistema nervioso y en tejidos periféricos, la alteración de la expresión de GPRC5B se ha asociado con señalización inflamatoria, sensibilidad a la insulina y manejo de lípidos, lo que la hace relevante para estudios de fenotipos asociados a la obesidad y disfunción cardiometabólica. Su localización en membrana y el contexto de señalización también respaldan investigaciones sobre la dinámica de redes proximales al receptor y programas transcripcionales sensibles a estímulos extracelulares.
GPRC5B El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Gprc5b en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Gprc5b. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Gprc5b. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Gprc5b alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.