Pas de données CRISPR : l'image illustre la qualité de l'anticorps pour la visualisation des résultats de l'expérience CRISPR.
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Plasmide CRISPR/Cas9 KO GPR84 (h): sc-401953
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- GPR84 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique GPR84, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GPR84 Antibody (1D9): sc-293447
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO GPR84 (h) | sc-401953 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
GPR84 code un récepteur couplé aux protéines G activé par des acides gras à chaîne moyenne et particulièrement exprimé dans les cellules de la lignée myéloïde, établissant un lien entre la détection des lipides et la signalisation de l’immunité innée. Lorsqu’il est stimulé, GPR84 active des voies dépendantes des GPCR qui modulent la signalisation des seconds messagers et des programmes transcriptionnels en aval contrôlant la production de cytokines, la chimiotaxie et l’activation des macrophages. Ce récepteur a été étudié dans le contexte du remodelage métabolique associé à l’inflammation et de la polarisation des cellules immunitaires au sein des microenvironnements tissulaires. Des altérations de l’activité de GPR84 ont été rapportées dans divers modèles de maladies inflammatoires et fibrosantes, ce qui étaye son utilisation comme nœud mécanistique pour explorer les voies immunométaboliques.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO GPR84 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GPR84 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GPR84, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GPR84 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine GPR84.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GPR84 pour l'étude de la signalisation de GPR84, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de GPR84 essentiels à la fonction de GPR84
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GPR84 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le GPR84 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le GPR84 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GPR84. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le GPR84 plasmide HDR (h) et le GPR84 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GPR84 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GPR84 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.