GPR22 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-428483

Descripción general

Gpr22 codifica GPR22, un receptor huérfano acoplado a proteínas G (GPCR) estudiado principalmente en biología cardíaca y vascular, donde se ha vinculado a la regulación de la señalización sensible al estrés y de programas de remodelación celular. Aunque su ligando endógeno sigue sin estar claro, el posible acoplamiento tipo GPCR sugiere una influencia sobre vías de segundos mensajeros como cAMP/PKA y la señalización MAPK, que modulan respuestas transcripcionales, el metabolismo y la función contráctil. En modelos murinos y estudios de expresión, GPR22 se ha asociado con fenotipos cardiovasculares, incluida la hipertrofia cardíaca y la remodelación relacionada con la insuficiencia cardíaca, lo que impulsa la investigación de su papel en la homeostasis de cardiomiocitos y células vasculares. Gpr22 también se utiliza como marcador en perfiles transcripcionales específicos de tejido para conectar estados de señalización de GPCR con redes génicas relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO GPR22 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Gpr22 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Gpr22 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Gpr22 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína GPR22.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Gpr22 para la investigación de la señalización de GPR22, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Gpr22 críticos para la función de GPR22
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Gpr22 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido GPR22 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido GPR22 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Gpr22. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR GPR22 (m) y el plásmido HDR GPR22 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Gpr22 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Gpr22 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.