Plasmide Double Nickase (h) GPR19: sc-407000-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GPR19 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR19 Double Nickase (h) et le plasmide GPR19 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GPR19. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GPR19 | sc-407000-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GPR19 | sc-407000-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GPR19 code un récepteur orphelin de classe A couplé aux protéines G (GPCR), localisé principalement sur des membranes intracellulaires, et a été impliqué dans la régulation de la signalisation des nucléotides cycliques, des programmes de survie cellulaire et de l’homéostasie neuronale/endocrinienne. Des études fonctionnelles rapportées relient GPR19 à la modulation des voies MAPK/ERK et dépendantes de l’AMPc, suggérant des rôles dans le couplage stimulus–réponse et le contrôle transcriptionnel en aval de la signalisation des GPCR. Les profils d’expression et les associations génétiques/omiques ont mis en lien GPR19 avec des phénotypes neurocomportementaux et des processus neurodégénératifs, notamment des corrélations décrites dans des jeux de données liés à la maladie de Parkinson. En tant que nœud de signalisation membranaire dont les ligands et effecteurs en aval restent imparfaitement définis, GPR19 suscite un intérêt pour disséquer l’architecture des voies GPCR et la signalisation dépendante du contexte dans des modèles de cellules humaines.
GPR19 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GPR19 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GPR19. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GPR19. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GPR19.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.