GnRHR Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401783-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GnRHRO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase GnRHR (h) e o Plasmídeo Double Nickase GnRHR (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para GNRHR. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GnRHR Anticorpo (GRX-5): sc-69845
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GnRHR Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401783-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GnRHR Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401783-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
GNRHR codifica o receptor humano do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRHR), um receptor acoplado à proteína G do tipo rodopsina, expresso predominantemente em gonadotrófos hipofisários. Após a ligação do GnRH hipotalâmico, o GnRHR acopla-se principalmente à Gαq/11 para ativar a fosfolipase Cβ, aumentando a sinalização por IP3/DAG, a mobilização de Ca2+ intracelular e a atividade das vias de PKC/MAPK, regulando a transcrição e a secreção do hormônio luteinizante e do hormônio folículo-estimulante. Esse eixo de sinalização integra entradas endócrinas pulsáteis para controlar o desenvolvimento reprodutivo e a fertilidade, e alterações na função de GNRHR estão associadas a distúrbios do eixo hipotálamo–hipófise–gônadas, como o hipogonadismo hipogonadotrófico congênito e fenótipos endócrinos reprodutivos relacionados. Em modelos celulares, o GnRHR oferece um ponto de estudo manejável para investigar a dessensibilização de GPCRs, o tráfego dependente de β-arrestina e a decodificação da frequência do estímulo.
GnRHR O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus GNRHR em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de GNRHR. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função GNRHR. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com GNRHR interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.