Plasmide Double Nickase (h) GNL3L: sc-412308-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GNL3L correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GNL3L Double Nickase (h) et le plasmide GNL3L Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GNL3L. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GNL3L | sc-412308-NIC | 20 µg | $410.00 |
GNL3L (protéine apparentée aux protéines liant les nucléotides de guanine 3, de type 3-like) est une protéine nucléolaire liant le GTP, impliquée dans la biogenèse des ribosomes et l’organisation du nucléole, et jouant un rôle dans la régulation de la progression du cycle cellulaire et de la prolifération. Elle participe au traitement des ARN et à l’assemblage de complexes ribonucléoprotéiques, reliant ainsi la fonction nucléolaire aux programmes de contrôle de la croissance. Une expression altérée de GNL3L a été rapportée dans des contextes prolifératifs et fait l’objet d’études en lien avec la biologie tumorale et les réponses au stress cellulaire qui affectent l’homéostasie du nucléole. Ces caractéristiques font de GNL3L une cible utile pour étudier comment les GTPases nucléolaires coordonnent la production des ribosomes avec les décisions de destin cellulaire.
GNL3L Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GNL3L dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GNL3L. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GNL3L. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GNL3L.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.