Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GMF-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-425657
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- GMF-β O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico GMF-β, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:GMF-β Anticorpo (SP-61): sc-134347
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
GMF-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-425657 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O fator de maturação glial beta (GMF-β), codificado pelo gene Gmfb em camundongos, é um regulador citosólico conservado da remodelação do citoesqueleto de actina, influenciando alterações de forma celular e motilidade em contextos neurais e relacionados ao sistema imune. O GMF-β interage com o complexo Arp2/3 para modular a dinâmica de ramificação da actina, conectando-o a vias que governam o crescimento de neuritos, a remodelação sináptica e as respostas de células gliais a sinais do ambiente. No sistema nervoso central, o GMF-β tem sido estudado em relação à sinalização neuroinflamatória e a programas de ativação celular associados ao estresse, nos quais a regulação alterada do citoesqueleto pode afetar a homeostase tecidual. Processos desregulados associados ao GMF-β são relevantes em modelos experimentais de neurodegeneração e lesão inflamatória por meio de efeitos sobre migração celular, gliose reativa e sinalização dependente do citoesqueleto.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO GMF-β (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Gmfb em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Gmfb, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Gmfb na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína GMF-β.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Gmfb para a investigação da sinalização de GMF-β, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Gmfb críticos para a função GMF-β
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Gmfb para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo GMF-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo GMF-β Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Gmfb. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo GMF-β Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR GMF-β (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Gmfb para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Gmfb definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.