Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Glutathione reductase Double Nickase Plasmid (h): sc-417499-NIC
- Zielspezies: human
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das Glutathione reductase Double Nickase Plasmid (h) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- Glutathione reductase Double-Nickase-Plasmid (h) und Glutathione reductase Double-Nickase-Plasmid (h2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf GSR abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: Glutathione reductase: sc-133245
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
Glutathione reductase Double Nickase Plasmid (h) | sc-417499-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Glutathione reductase Double Nickase Plasmid (h2) | sc-417499-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Das humane Gen **GSR** kodiert die Glutathionreduktase, eine flavoproteinhaltige Oxidoreduktase, die unter Verbrauch von NADPH oxidiertes Glutathion (GSSG) zu reduziertem Glutathion (GSH) reduziert und damit die zelluläre Redox-Pufferkapazität aufrechterhält. Durch die Stabilisierung des GSH/GSSG-Verhältnisses unterstützt GSR die Entgiftung reaktiver Sauerstoffspezies und elektrophiler Verbindungen, ist mit der glutathionabhängigen Peroxidaseaktivität verknüpft und trägt zur Redoxkontrolle in Mitochondrien und Zytosol bei. Das Enzym ist in NADPH-bildende Stoffwechselwege wie den Pentosephosphatweg eingebunden und hilft, die Thiol-Homöostase zu bewahren, die Proteinfaltung, Signalübertragung und antioxidative Abwehr beeinflusst. Eine veränderte Glutathion-Regeneration und ein Redox-Ungleichgewicht werden häufig in Zusammenhängen wie Anfälligkeit für oxidativen Stress, hämolytischen Phänotypen, Stoffwechselstörungen und Tumorbiologie untersucht, wobei GSR-abhängige Signal- und Stoffwechselwege die zelluläre Fitness und Stressantworten modulieren können.
Glutathione reductase Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des GSR-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von GSR abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die GSR-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit GSR-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.