Plasmide CRISPR/Cas9 KO Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h): sc-400631

Présentation

GPX1 code la sélénoprotéine cytosolique glutathion peroxydase 1, une protéine majeure de défense antioxydante qui réduit le peroxyde d’hydrogène et les hydroperoxydes lipidiques en utilisant le glutathion comme donneur d’électrons. En limitant l’accumulation d’espèces réactives de l’oxygène, GPX1 contribue au maintien de l’homéostasie rédox et influence des réseaux de signalisation liés aux réponses au stress oxydant, notamment les programmes régulés par NRF2, la fonction mitochondriale et les voies inflammatoires. Une activité altérée de GPX1 a été associée à des mécanismes pertinents pour la biologie du cancer, les dysfonctionnements métaboliques, la neurodégénérescence et les pathologies cardiovasculaires, où un déséquilibre rédox peut remodeler les phénotypes de survie cellulaire et d’adaptation au stress. En tant qu’enzyme largement exprimée, GPX1 est fréquemment utilisée pour étudier comment la capacité antioxydante module les réponses aux dommages de l’ADN, la sensibilité à la ferroptose et les réponses cellulaires à l’hypoxie ou aux signaux inflammatoires.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène GPX1 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du GPX1, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert GPX1 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Glutathione Peroxidase 1/GPX1.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en GPX1 pour l'étude de la signalisation de Glutathione Peroxidase 1/GPX1, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de GPX1 essentiels à la fonction de Glutathione Peroxidase 1/GPX1
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de GPX1 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Glutathione Peroxidase 1/GPX1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Glutathione Peroxidase 1/GPX1 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus GPX1. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Glutathione Peroxidase 1/GPX1 plasmide HDR (h) et le Glutathione Peroxidase 1/GPX1 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie GPX1 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles GPX1 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.