Plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut6 (h): sc-406852

Présentation

SLC2A6 code le transporteur de glucose Glut6 (GLUT6), un transporteur facilitateur d’hexoses de la famille SLC2, qui soutient l’absorption cellulaire de glucose et la disponibilité de substrats métaboliques. L’expression de GLUT6 est enrichie dans les lignées immunitaires et hématopoïétiques et répond à des signaux d’activation, ce qui l’associe à des modifications de la glycolyse, de la phosphorylation oxydative et, plus largement, des programmes immunométaboliques. En contrôlant les flux intracellulaires de glucides, GLUT6 peut influencer l’équilibre rédox, les voies biosynthétiques et des nœuds de signalisation tels qu’AMPK et mTOR, qui couplent l’état nutritionnel à la croissance et à la survie cellulaires. Une expression dérégulée de SLC2A6 a été rapportée dans des contextes inflammatoires et dans plusieurs cancers, ce qui motive des études mécanistiques sur la manière dont un transport du glucose altéré reprogramme le métabolisme des cellules tumorales et immunitaires.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut6 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène SLC2A6 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du SLC2A6, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert SLC2A6 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Glucose Transporter Glut6.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en SLC2A6 pour l'étude de la signalisation de Glucose Transporter Glut6, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de SLC2A6 essentiels à la fonction de Glucose Transporter Glut6
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de SLC2A6 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Glucose Transporter Glut6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le Glucose Transporter Glut6 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus SLC2A6. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Glucose Transporter Glut6 plasmide HDR (h) et le Glucose Transporter Glut6 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie SLC2A6 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles SLC2A6 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.