Plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut5 (m): sc-425193

Présentation

Slc2a5 code le transporteur de glucose Glut5 (GLUT5), un transporteur facilitateur d’hexoses à forte spécificité pour le fructose, qui assure l’absorption apicale du fructose et contribue à la gestion des glucides dans l’épithélium intestinal et d’autres tissus. En régulant l’entrée du fructose, GLUT5 soutient le métabolisme énergétique cellulaire et influence le flux glycolytique ainsi que les voies de synthèse lipidique en aval, reliant la disponibilité des nutriments au remodelage métabolique. Une expression altérée de SLC2A5/GLUT5 a été associée à des phénotypes métaboliques sensibles au régime alimentaire et est fréquemment étudiée dans des contextes d’absorption intestinale, de métabolisme hépatique et d’utilisation des nutriments par les cellules tumorales. Dans des modèles murins, Slc2a5 constitue un nœud expérimental pertinent pour étudier comment le transport du fructose façonne l’équilibre énergétique systémique et le stress métabolique du microenvironnement.

Le plasmide CRISPR/Cas9 KO Glucose Transporter Glut5 (m) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène Slc2a5 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du Slc2a5, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.

La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert Slc2a5 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine Glucose Transporter Glut5.

Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en Slc2a5 pour l'étude de la signalisation de Glucose Transporter Glut5, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.

Caractéristiques principales

• sgRNA ciblant le ou les exons de Slc2a5 essentiels à la fonction de Glucose Transporter Glut5
  Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
  Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
  Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de Slc2a5 pour améliorer l'efficacité du knock-out
  Compatible avec l'administration par transfection

Variantes de conception

CRISPR +/- HDR

• Les gRNA codés par le Glucose Transporter Glut5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m) et le Glucose Transporter Glut5 plasmide CRISPR/Cas9 KO (m2) ciblent des sites distincts au sein du locus Slc2a5. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
  Les constructions donneuses HDR codées par le Glucose Transporter Glut5 plasmide HDR (m) et le Glucose Transporter Glut5 (m2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie Slc2a5 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles Slc2a5 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.