Particules Lentivirales d'Activation (h) Glucose Transporter Glut3: sc-400584-LAC

SLC2A3 code le transporteur de glucose GLUT3 (Glut3), un transporteur facilité du glucose à haute affinité, qui soutient le métabolisme énergétique cellulaire en assurant la captation basale du glucose ainsi que celle induite par le stress. GLUT3 contribue au flux glycolytique et relie la disponibilité en nutriments à des processus en aval, notamment la respiration mitochondriale, l’équilibre rédox et les programmes de survie cellulaire, avec des rôles marqués dans des contextes à forte demande métabolique tels que le fonctionnement des neurones et des cellules immunitaires. Une expression altérée de SLC2A3 a été associée à la reprogrammation métabolique et à des voies d’adaptation à l’hypoxie, y compris des interactions avec la signalisation HIF-1 et l’utilisation des nutriments régulée par l’axe PI3K–AKT–mTOR. Une activité dérégulée de GLUT3 est donc pertinente pour les études sur l’inflammation, la neurobiologie et le métabolisme des cellules cancéreuses, où le transport du glucose peut influencer la prolifération, la différenciation et les réponses au stress.

Les particules d'activation lentivirales Glucose Transporter Glut3 (h) répondent à ce besoin en encapsulant le système complet d'activation transcriptionnelle SAM (Synergistic Activation Mediator) dans des particules lentivirales à titre élevé prêtes à la transduction, permettant une régulation à la hausse efficace de SLC2A3 dans un plus large éventail de types de cellules humaines.

Les particules d'activation lentivirales Glucose Transporter Glut3 (h) délivrent tous les composants fonctionnels du système médiateur d'activation synergique (SAM) via la transduction lentivirale. Le système comprend trois préparations de particules co-transduites dans les cellules cibles : l'une codant pour une dCas9 catalytiquement inactive (mutations D10A et N863A) fusionnée au domaine de transactivation VP64 avec un gène de résistance à la blasticidine ; une codant pour la protéine de fusion MS2-p65-HSF1 avec un gène de résistance à l'hygromycine ; et une codant pour un ARNsg de 20 nt spécifique de la cible, fusionné à deux aptamères d'ARN MS2 avec un gène de résistance à la puromycine. Après transduction lentivirale et intégration génomique des cassettes d'expression, les composants du SAM sont exprimés de manière stable et s'assemblent au locus cible dans la région promotrice proximale en amont du site de départ de la transcription SLC2A3, où VP64, p65 et HSF1 agissent de manière coopérative pour recruter l'appareil transcriptionnel endogène et induire une régulation à la hausse soutenue de l'expression endogène de Glucose Transporter Glut3. L'utilisation de dCas9 inactif sur les nucléases évite l'introduction de cassures double brin de l'ADN et préserve le locus génomique natif SLC2A3 ainsi que l'architecture régulatrice.

Le format lentiviral offre plusieurs avantages pratiques : l'intégration génomique stable permet une activation héréditaire au fil des divisions cellulaires ; les préparations de particules à titre élevé éliminent le besoin d'une production virale en interne ; et la compatibilité avec les types de cellules primaires, non divisibles et résistantes à la transfection élargit l'accessibilité expérimentale. Le succès de la transduction peut être confirmé et renforcé par une triple sélection antibiotique utilisant la puromycine, l'hygromycine et la blasticidine.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.