Partículas Lentivirales de Activación (h) Glucose Transporter Glut3: sc-400584-LAC

SLC2A3 codifica el transportador de glucosa GLUT3 (Glut3), un transportador facilitador de glucosa de alta afinidad que sostiene el metabolismo energético celular al mediar la captación de glucosa basal y la inducida por estrés. GLUT3 contribuye al flujo glucolítico y vincula la disponibilidad de nutrientes con procesos posteriores, como la respiración mitocondrial, el equilibrio redox y los programas de supervivencia celular, con funciones destacadas en contextos de alta demanda metabólica, como la actividad de neuronas y células inmunitarias. La expresión alterada de SLC2A3 se ha asociado con la reprogramación metabólica y con vías adaptativas a la hipoxia, incluido el crosstalk con la señalización de HIF-1 y el uso de nutrientes regulado por PI3K–AKT–mTOR. Por ello, la actividad desregulada de GLUT3 es relevante en estudios de inflamación, neurobiología y metabolismo de células cancerosas, donde el transporte de glucosa puede moldear la proliferación, la diferenciación y las respuestas al estrés.

Las partículas de activación lentiviral Glucose Transporter Glut3 (h) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de SLC2A3 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Glucose Transporter Glut3 (h) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción SLC2A3, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Glucose Transporter Glut3. El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo SLC2A3 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.