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Glucose Transporter Glut2CRISPR激活质粒(h) | sc-400347-ACT | 20 µg | $397.00 |
SLC2A2 编码易化葡萄糖转运蛋白 GLUT2。GLUT2 属于低亲和力、高容量的载体,可支持葡萄糖跨质膜的双向转运。在人体内,GLUT2 参与肝脏、胰岛 β 细胞、肾脏和肠道等组织的葡萄糖感知与代谢稳态维持,影响糖酵解、糖异生以及胰岛素分泌动力学。其活性通过调控细胞内葡萄糖可及性及下游信号反应,与碳水化合物和能量代谢通路相整合。SLC2A2 的表达或功能异常与代谢失调表型相关,因此是研究葡萄糖处理机制及营养应答型转录程序的有用靶点。
Glucose Transporter Glut2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SLC2A2的表达。
Glucose Transporter Glut2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SLC2A2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SLC2A2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Glucose Transporter Glut2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SLC2A2位点,并能够研究内源性位点上依赖于Glucose Transporter Glut2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SLC2A2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Glucose Transporter Glut2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。