Plásmido Doble Nickase (m) Glucose Transporter Glut1: sc-422998-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Glucose Transporter Glut1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Glucose Transporter Glut1 (m) y el plásmido de doble nickasa Glucose Transporter Glut1 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Slc2a1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Glucose Transporter Glut1 | sc-422998-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) Glucose Transporter Glut1 | sc-422998-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Slc2a1 codifica el transportador facilitador de glucosa GLUT1 (SLC2A1), un transportador de alta afinidad que media la captación basal de glucosa a través de la membrana plasmática en muchos tipos celulares de ratón, incluidos los linajes endotelial e inmunitario. Al controlar la disponibilidad intracelular de glucosa, GLUT1 sostiene la glucólisis, el metabolismo oxidativo y las vías biosintéticas que influyen en el crecimiento celular, el equilibrio redox y las respuestas al estrés. La expresión de Slc2a1 y el tráfico de GLUT1 están estrechamente regulados por la detección de nutrientes y la señalización por hipoxia, integrando señales de vías como programas transcripcionales dependientes de HIF y redes de homeostasis energética. La alteración de la actividad de GLUT1 se asocia con reprogramación metabólica en contextos proliferativos e inflamatorios, y Slc2a1 se estudia ampliamente en modelos de función neurovascular, inmunometabolismo y defectos del transporte de glucosa.
Glucose Transporter Glut1 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Slc2a1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Slc2a1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Slc2a1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Slc2a1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.