Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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GLP-1R Double Nickase Plasmid (m): sc-420581-NIC
- Zielspezies: mouse
- 20 µg transfektionsfertige, aufgereinigte Plasmid DNA; geeignet für 20 Transfektionen
- Das GLP-1R Double Nickase Plasmid (m) wird als Plasmid-Paar geliefert. Die einzelnen Plasmide kodieren für eine D10A mutierte Cas9 Nuklease sowie für je eine unterschiedliche, zielspezifische 20nt guide RNA (gRNA) Sequenz. Dies erlaubt eine hohe Knockout-Effizienz bei gleichzeitig größerer Spezifität als das entsprechende CRISPR/Cas9 KO Plasmid
- gRNA Sequenzpaare liegen ca. 20 bp auseinander um ein spezifisches Cas9-vermitteltes "Double Nicking" der genomischen DNA zu erlauben und so im Resultat den Effekt eines Doppelstrangbruchs nachzuahmen.
- Ein Plasmid kodiert für ein Puromycin-Resistenzgen zur Selektion von stabilen Knockout-Zellen. Das andere Plasmid kodiert für ein GFP-Gen für den visuellen Nachweis der Transfektion
- GLP-1R Double-Nickase-Plasmid (m) und GLP-1R Double-Nickase-Plasmid (m2) kodieren unterschiedliche gepaarte gRNA-Designs, die auf Glp1r abzielen. Möglicherweise ist eines oder sind beide Designs verfügbar
- Nach der Transfektion kann die Effizienz des Gen-Knockouts per Western Blot oder histologisch mit folgendem Antikörper überprüft werden: GLP-1R: sc-390774
Bestellinformation
| Produkt | Katalog # | EINHEIT | Preis | ANZAHL | Favoriten | |
GLP-1R Double Nickase Plasmid (m) | sc-420581-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
GLP-1R Double Nickase Plasmid (m2) | sc-420581-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Glp1r kodiert den Glucagon-like Peptide-1-Rezeptor (GLP-1R) der Maus, einen GPCR der Klasse B, der auf Inkretinhormone reagiert und die glukoseabhängige Insulinsekretion sowie eine umfassendere metabolische Homöostase reguliert. Nach Ligandenbindung aktiviert GLP-1R eine Gs-vermittelte cAMP-Produktion und nachgeschaltete PKA/EPAC-Signalwege, was die Aktivität von Ionenkanälen, die Vesikelexozytose und Transkriptionsprogramme in den pankreatischen Inseln beeinflusst, ebenso wie Schaltkreise für Sättigung und Energiebilanz. Die GLP-1R-Signalübertragung ist mit PI3K/AKT- und MAPK-Signalwegen verknüpft und verbindet damit Nährstoffsensorik mit Zellüberleben und adaptiven Antworten. Eine Fehlregulation der Glp1r-abhängigen Signalübertragung ist für experimentelle Modelle von Diabetes, Adipositas und kardiometabolischer Physiologie relevant und macht Glp1r zu einem nützlichen Ziel, um die endokrine und neuroendokrine Kontrolle des Stoffwechsels zu untersuchen.
GLP-1R Das Double-Nickase-Plasmid (m) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des Glp1r-Lokus in mouse-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von Glp1r abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die Glp1r-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.
Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit Glp1r-Störung.
Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.