Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) GKLF/KLF4: sc-400312-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)GKLF/KLF4 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa GKLF/KLF4 (h) y el plásmido de doble nickasa GKLF/KLF4 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a KLF4. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: GKLF/KLF4 Anticuerpo (B-8): sc-393462
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) GKLF/KLF4 | sc-400312-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) GKLF/KLF4 | sc-400312-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KLF4 (GKLF) codifica un factor de transcripción con dedos de zinc que regula la diferenciación epitelial, el control del ciclo celular y el mantenimiento de la identidad celular. Al modular programas transcripcionales vinculados a las vías de señalización MAPK, Wnt/β-catenina y TGF-β, KLF4 influye en la proliferación, la función de barrera y las respuestas al estrés, incluido el crosstalk con puntos de control dependientes de p53. KLF4 también es uno de los factores canónicos de reprogramación y contribuye a la remodelación del estado de la cromatina durante la conversión de linaje. La actividad desregulada de KLF4 se ha asociado con estados de diferenciación alterados y con funciones dependientes del contexto en la oncogénesis y en patologías inflamatorias, lo que la convierte en un nodo útil para estudios mecanísticos de la regulación transcripcional.
GKLF/KLF4 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus KLF4 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de KLF4. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de KLF4. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con KLF4 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.